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猪群监测新方法——唾液检测法
来源:南方饲料信息网 作者:sefweb6 日期:2011年01月10日 访问次数:

  对猪群用唾液检测法来进行监测,这在国内正式报告尚属首次,但在美国已经在2年前用于检测PRRS病毒,而在人医上,唾液已经应用到检测艾滋病。人们习惯的血清学检测由于对血液采集技术要求高,对猪应激大,一些猪场往往只在发病时才对猪群进行检测,但如果唾液检测法能适用,十分值得推广。本文简单介绍唾液检测法的使用方法,供参考。

  血清学检测在猪群免疫监测和疾病诊断中发挥着重大作用,但由于血液采集对技术要求较高,必须具备专用的血清分离设备(如离心机等),且操作程序复杂,况且一旦发生溶血或污染,对检测结果影响较大。人们一直期望有新的检测方法,唾液学方法是其中较有发展前景的方法之一。

  唾液学方法有很多优点:采集的唾液可以直接冷冻,唾液中的各种酶类(如唾液淀粉酶、碱性蛋白酶)和抗菌物质可以使样品保存更长时间;采集唾液的方法简单,所以唾液学方法对机体无任何损伤,不会造成猪只应激。另外,唾液中的抗体以分泌型抗体为主,对于免疫功能的解释具有特殊的意义。

  唾液采集方法:

  唾液采集的方法非常简单,利用猪只的好奇心理以及嗜好咀嚼的特性,采用纱布球采集唾液。将纱布制作成纱布球固定于金属线前端,猪只会主动咀嚼纱布球,唾液将通过虹吸现象进入纱布球内。将纱布球内的唾液挤压出,释放至样品袋袋内。将样品袋内的唾液转移至离心管内。

  检测方法:

  采集的血液必须进行预处理,方可进行抗体或病原等项目的检测。10x104转/分钟,离心1分钟,去除杂质,留取上清。按照常规程序进行ELISA或PCR检测。

  结果判定:

  1、唾液中的病原检测若呈阳性,说明机体正在排毒。

  2、由于唾液中的抗体和血液中的抗体不是同一个概念,必须避免使用对血清抗体的理解来解释唾液中抗体的作用。血清中的抗体大部分为循环抗体,某些循环抗体的抗病活性较低,只能与抗原起机械结合作用。而分泌型抗体的产生速度是血清循环抗体产生速度的两倍,分泌型抗体除具有机械结合作用外,尚具有对抗原的主动捕捉作用,补体的经典和补充途径激活作用,ADCC作用以及凝集作用。

  为了便于理解唾液中的抗体作用,可以采用相对抗体(相对量抗体)的概念。

  相对抗体:

  指按照同一方法检测出抗体量的相对大小,往往指同一实验室,同一类试剂盒,同一类样品所得出结果的相对大小(百分比表示)。相对抗体的修正参数必须建立在大量检测数据的基础之上,这些数据必须包括完全阴性值,低抗体滴度值,中抗体滴度值和高抗体滴度值,样本以大样本量为宜,标准差至少在30以上。

  相对抗体的概念解决了不同实验室之间,不同试剂盒之间和不同类型样品之间(如血液与唾液)的测定值的可比性问题,相对抗体值的大小亦不受试剂盒阴阳性对照值大小的影响。而绝对量抗体则不具备此类特性。

  重要说明:

  唾液中出现分泌型抗体,说明机体近期被病原感染或近期接受弱毒疫苗的免疫接种;分泌型抗体的出现,也同时说明机体具备对某病原的实质性抵抗能力。

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